做培養(yǎng)時(shí)注意培養(yǎng)箱濕度

箱內(nèi)濕度對(duì)于培養(yǎng)工作來(lái)說(shuō)是一項(xiàng)非常重要然而又經(jīng)常被忽略的因素。因?yàn)轱柡蜐穸拳h(huán)境可以避免培養(yǎng)液中二氧化碳逃逸 , 培養(yǎng)液中 pH 值穩(wěn)定 , 有利于細(xì)胞生長(zhǎng) , 足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復(fù)速度 (如在開(kāi)關(guān)門后)才能保證不會(huì)由于過(guò)度干燥而導(dǎo)致培養(yǎng)失敗。
所以二氧化碳培養(yǎng)箱使用過(guò)程中, 在箱內(nèi)托盤中放一定量的滅菌水(3/2**全盤), 使箱內(nèi)成為飽和濕度環(huán)境。如使用者忘記補(bǔ)加水 , 使培養(yǎng)細(xì)胞處于低濕度甚**干熱環(huán)境中, 培養(yǎng)液二氧化碳?xì)怏w易揮發(fā), 液體 pH 值升高, 影響細(xì)胞生長(zhǎng), 在工作中要力求避免此問(wèn)題發(fā)生。
樣本多時(shí), 箱內(nèi)分區(qū)存放 , 培養(yǎng)物用筐或瓷盤存放 , 這樣存取快速 , 縮短開(kāi)門時(shí)間, 減少箱內(nèi)氣體和濕度變化, 節(jié)省氣體 , 穩(wěn)定了細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境。

防止二氧化碳培養(yǎng)箱污染做好箱內(nèi)消毒
 
CO2培養(yǎng)箱污染是導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)失敗的一個(gè)主要因素, 所以要減少和防止污染的發(fā)生 , 主要途徑是盡量減少微生物可以生長(zhǎng)的區(qū)域和表面, 采取消毒措施。
例如, 針對(duì)箱內(nèi)濕熱環(huán)境易滋生細(xì)菌等問(wèn)題, 我們采用在1000mL 水中加2 mL 新潔爾滅液, 定期用酒精和紫外線消毒箱內(nèi)空氣 , 培養(yǎng)物酒精擦拭入箱內(nèi), 盤里的水**少要一周換一次 , 控制污染 , 可以維持適應(yīng)的蒸發(fā)作用, 減少箱內(nèi)微生物滋生速度。為了培養(yǎng)箱免受污染并且保證儀器箱體內(nèi)的生物清潔性, 有些CO2培養(yǎng)箱設(shè)計(jì)了自動(dòng)排除污染裝置來(lái)有效防止污染的產(chǎn)生。
目前有多種消毒滅菌方式, 如帶有紫外消毒功能的 CO2 培養(yǎng)箱。還有的設(shè)計(jì)生產(chǎn)了 HEPA 過(guò)濾器能過(guò)濾培養(yǎng)箱內(nèi)空氣, 可過(guò)濾除去 99.97 %的 0.3 μm 以上的顆粒 , 此外, 還有設(shè)計(jì)了能使箱內(nèi)達(dá)到高溫濕熱的環(huán)境從而殺死污染微生物 , 達(dá)到消毒滅菌目的的培養(yǎng)箱。